分光光度计是一种测量物质对不同波长光吸收程度的精密光学仪器,主要用于化学、生物、环境科学、医学诊断等领域。其工作原理基于比尔-朗伯定律(Beer-Lambert Law),该定律指出,当一束平行单色光通过溶液样品时,溶液对光的吸收程度与溶液的浓度和光程长度成正比。
分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器和数据处理系统等部分组成:
光源:提供连续或特定波段的光谱,常见的有氘灯、钨卤素灯等。
单色器:将光源发出的复合光分解为单一波长的光,通常采用棱镜或光栅作为分光元件。
样品室:放置待测样品的地方,光线通过样品后被吸收一部分,剩余的透射光强度会因样品中目标物质浓度的不同而变化。
检测器:如光电倍增管或硅光电二极管,用于接收并转换透射或吸光后的光信号为电信号。
数据处理系统:将检测器输出的电信号转化为可读的数据,通过内置软件计算出样品的吸光度,并根据标准曲线或其他分析方法得出样品的浓度或其他所需参数。
分光光度法具有灵敏度高、准确度好、操作简便等特点,在科研、教学、生产质量控制以及环境保护等方面有着广泛的应用,例如测定水体中的化学物质浓度、药物含量分析、酶活性测定、DNA/RNA定量及纯度评估等。